第一代测序原理是基于Sanger测序技术的。该技术利用DNA聚合酶在DNA合成过程中加入dideoxynucleotide（ddNTP）来终止DNA链的延伸，从而生成一系列不同长度的DNA片段。这些片段经过电泳分离后，可以根据其长度确定DNA序列。该技术需要大量的DNA模板和手动操作，速度较慢，但精度高，被广泛应用于基因组测序和DNA序列分析。