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pcr原理

pcr原理
PCR(聚合酶链反应)是一种体外扩增DNA的技术,其原理基于DNA的双链结构和DNA聚合酶的催化作用。PCR的过程包括三个步骤:变性、退火和延伸。
变性:将DNA双链分离为两条单链,使其成为模板。这一步需要高温(通常为94-98℃)和一定浓度的镁离子。
退火:在较低的温度下(通常为50-65℃),引入两个特异性引物,使其与模板DNA的两端互补结合。引物的长度通常为18-25个核苷酸,其序列应与目标DNA的两端互补。
延伸:在适当的温度下(通常为72℃),DNA聚合酶沿着模板DNA的单链进行扩增,合成新的DNA链。这一步需要四种核苷酸和一定浓度的镁离子。
PCR的三个步骤可以循环进行,每个循环会使目标DNA的数量翻倍,因此PCR可以在短时间内扩增大量的DNA。PCR的应用广泛,包括基因克隆、基因检测、DNA测序等。

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